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细胞计数板使用方法及公式_细胞计数板使用方法

2023-07-04 16:21:59 来源:互联网

1、博凌科为生物科技-为你解答:血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。


(资料图片仅供参考)

2、中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格 网,每个方格网共分九个大格,中央的一大格作为计数用,称为计数区。

3、计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方 格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成16个小方格。

4、但是不管计数区是哪一种构造,它 们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成。

5、计数区边长为1mm,则计数区的面积为1mm2,每个小方格的面积为1/400mm2。

6、盖上盖玻片后,计数区的高度为0.1mm,所以每个计数区的体积为0.1mm3,每个小方格的体积为1/4000mm3。

7、使用细胞计数板计数时,先要测定每个小方格中微生物的数量,再换算成每毫升菌液(或每克样品)中微生物细胞的数量。

8、细胞计数板-使用方法1.视待测菌悬液浓度,加无菌水适当稀释(斜面一般稀释100倍),以每小格的菌数可数为度。

9、2.取洁净的细胞计数板一块,在计数区上盖上一块盖玻片。

10、3.将菌悬液摇匀,用滴管吸取少许,从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘摘入一小滴(不宜过多),让菌悬液利用液体的表面张力充满计数 区,勿使气泡产生,并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。

11、也可以将菌悬液直接滴加在计数区上(不要使计数区两边平台沾上菌悬液,以免加盖盖玻片后,造成 计数区深度的升高),然后加盖盖玻片(勿使产生气泡)。

12、4.静置片刻,使细胞沉降到计数板上,不再随液体漂移。

13、将细胞计数板放置于显微镜的载物台上夹稳,先在低倍镜下找到计数区后,再转换高倍镜观察并计数。

14、由于生活细胞的折光率和水的折光率相近,观察时应减弱光照的强度。

15、5.计数时若计数区是由16个大方格组成,按对角线方位,数左上、左下、右上、右下的4个大方格(即100小格)的菌数。

16、如果是25个大方格组成的计数区,除数上述四个大方格外,还需数中央1个大方格的菌数(即80个小格)。

17、为 了保证计数的准确性,避免重复计数和漏记,在计数时,对沉降在格线上的细胞的统计应有统一的规定。

18、如菌体位于大方格的双线上,计数时则数上线不数下线,数 左线不数右线,以减少误差。

19、即位于本格上线和左线上的细胞计入本格,本格的下线和右线上的细胞按规定计入相应的格中。

20、见下图:即本格中计数细胞为3个。

21、6.对于出芽的酵母菌,芽体达到母细胞大小一半时,即可作为两个菌体计算。

22、每个样品重复计数2-3次(每次数值不应相差过大,否则应重新操作),按公式计算出每mL(g)菌悬液所含细胞数量。

23、7.测数完毕,取下盖玻片,用水将细胞计数板冲洗干净,切勿用硬物洗刷或抹擦,以免损坏网格刻度。

24、洗净后自行晾干或用吹风机吹干,放入盒内保存。

25、细胞计数板-计数公式16格25格的细胞计数板计算公式:细胞数/ml=100小格内细胞个数/10040010000稀释倍数25格16格的细胞计数板计算公式:细胞数/ml=80小格内细胞个数/8040010000稀释倍数。

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